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細胞株通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養物稱(chēng)為細胞株,是用單細胞分離培養或通過(guò)篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個(gè)培養期間始終存在。特殊性質(zhì)或標志必須在整個(gè)培養期間始終存在。對于人類(lèi)腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長(cháng)穩定,并連續傳代的即可稱(chēng)為連續性株或系。細胞株的建立實(shí)驗是通過(guò)細胞與低劑量的藥物長(cháng)期接觸,引起細胞本身生物化學(xué)過(guò)程的改變,細胞膜上出現Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。工具...
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標記細胞株是細胞系中特定標簽(Luc、GFP、RFP等)的穩定轉移,該細胞系可用作示蹤細胞,為細胞成像和體內成像提供了很大的便利。標記細胞株的分離和培養:1、在無(wú)菌條件下,取出1-3DSD大鼠的心房組織,然后用PBS清洗組織塊兩次,然后將組織切成1mm3左右;2、在組織塊中加入4ml酶消化液(0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶),懸停10s,37℃消化10min,然后用滴定管吹成單細胞懸液,自然沉淀收集取上清,用10%fbs培養基消化終止后置于4℃;3、剩余組織加入3~4m...
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凋亡或者說(shuō)程序性細胞死亡,是細胞內建的防御機制之一,在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過(guò)程與通路的異常,會(huì )導致多種疾病,包括腫瘤。目前至少有十數種檢測細胞凋亡的方法,從大框架上講,可以劃分為基于細胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標記三大類(lèi)。那么細胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢?1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個(gè)細胞形態(tài)學(xué)概念。因此,鑒定凋亡的金指標,往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細胞死亡類(lèi)型“壞死”有著(zhù)顯著(zhù)的亞細胞形態(tài)差異。簡(jiǎn)而言之,在透射電鏡下,凋亡...
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在制藥行業(yè),細胞培養已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細胞培養技術(shù)已被用于生產(chǎn)針對輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風(fēng)疹和水痘的抗體?;诩毎牧鞲锌贵w也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養的前景如何?3D細胞培養出于多種原因,對2D細胞培養的需求正在增加。2D細胞培養方法包括在平面上將細胞培養成2D單層。二維貼壁細胞培養從根本上限制了細胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細胞培養來(lái)解決這些問(wèn)題。這些培養物已被證明在一些基本生物學(xué)機制的研究中是有效的,例如細胞數量監測、細胞活力、...
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要了解細胞凋亡檢測方法,首先要了解細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化,形態(tài)學(xué)觀(guān)察表明細胞凋亡的變化是多階段的。細胞凋亡往往涉及多個(gè)細胞,甚至少數細胞也異步發(fā)生。首先細胞體積縮小,連接消失,與周?chē)毎蛛x,然后細胞質(zhì)密度增加,隨后會(huì )發(fā)生一系列變化:線(xiàn)粒體膜電位消失;滲透率變化;將細胞c釋放到細胞質(zhì)中;核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂;DNA被降解成180bp-200bp左右的片段,在細胞膜內形成囊泡;絲氨酸膜表面轉向磷脂膜內側;細胞膜結構仍然完好無(wú)損??梢詫⒌蛲黾毎臍埡》指畎扇舾蓚€(gè)凋亡小體而不...
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作為生命科學(xué)領(lǐng)域的一項長(cháng)期技術(shù),二維細胞培養使人類(lèi)能夠在體外研究細胞的生理和病理。然而,隨著(zhù)對細胞微環(huán)境概念的逐漸了解,科學(xué)家發(fā)現二維培養細胞的生理狀態(tài)和活性與體內細胞并不*一致,結果往往與動(dòng)物實(shí)驗和臨床結果不一致。實(shí)驗。因此,在過(guò)去的十年里,科學(xué)家們一直致力于開(kāi)發(fā)各種3D細胞培養技術(shù),為細胞提供更類(lèi)似于體內環(huán)境的培養環(huán)境。研究人員逐漸意識到,為了在體外實(shí)現細胞的形態(tài)、結構和生理功能,3D細胞培養需要能夠模擬體內環(huán)境的關(guān)鍵特征,包括細胞、細胞和細胞外基質(zhì)之間的相互作用,以及細...
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耐藥細胞株在長(cháng)期保存和傳代過(guò)程中受到各種不穩定因素的影響,例如,細胞遺傳污染和基因變異。因此,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后,細胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化,導致其生物學(xué)特性發(fā)生變化,從而降低動(dòng)物模型的一致性和可比性。因此,為了保證動(dòng)物模型的穩定性,必須對細胞株的質(zhì)量進(jìn)行監測。那么你對它的培養方法了解多少?所有轉染腫瘤和病毒的細胞都被認為具有潛在的生物危害,必須在二級生物安全平臺上操作,請注意防護。所有與該單元接觸的廢液和容器只能在高壓滅菌后丟棄。收到耐藥細胞株后,用倒置透鏡觀(guān)察整個(gè)細胞的生長(cháng)情...
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胎牛血清FBS是一種性能強的血清產(chǎn)品,適用于精細細胞系的培養,使用3次0.1μM過(guò)濾方法和40多項質(zhì)量控制測試。經(jīng)細胞培養試驗,該產(chǎn)品可用于腫瘤細胞、淋巴細胞、雜交瘤、內皮細胞等。經(jīng)過(guò)多道分離純化過(guò)濾工藝,質(zhì)地純凈,內毒素等免疫原性蛋白含量極低,適用于各種細胞的取樣培養,尤其是干細胞、原代細胞和其他血清依賴(lài)性高的細胞(如胚胎干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞和星形膠質(zhì)細胞),以及其他高要求的實(shí)驗研究對于血清質(zhì)量。胎牛血清FBS解凍要求:1、請在2℃~8℃的環(huán)境中解凍,不宜在較高溫度解凍...
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