一、原代細胞分離培養介紹

原代細胞(primary cell)是指從生物體獲取細胞直接培養。常用的原代細胞分離培養方法有組織塊培養和分散組織培養。

組織塊培養：是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上，加入培養基后進(jìn)行培養。

組織塊培養法是常用的、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。將組織塊剪切成小塊后，接種于培養瓶，組織小塊貼壁24h或更長(cháng)時(shí)間后，細胞就從組織四周游出。但由于在反復剪切和接種過(guò)程中對組織塊的損傷，并不是每個(gè)小塊都能長(cháng)出細胞。用于組織塊培養的培養瓶可根據不同細胞生長(cháng)的需要作適當處理，如：預先涂以鼠尾膠原薄層，以利于上皮樣細胞等的生長(cháng)。

分散組織培養：是將組織塊從機體中取出離散成單個(gè)細胞，置于合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長(cháng)和繁殖。分散組織培養也是常用的一種原代細胞培養方法，通常用機械法或化學(xué)法將組織塊分散為單細胞。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性較好的游離細胞，經(jīng)典的方法是用蛋白水解酶(如胰蛋白酶和膠原酶)消化細胞間的結合物，或用金屬離子螯合劑(如EDTA)除去細胞互相粘著(zhù)所依賴(lài)的Ca2+，再經(jīng)機械輕度振蕩，使之成為單細胞。

二、注意事項

1. 取材的組織要盡快培養。如若不能及時(shí)培養，可將組織浸泡于培養液內，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時(shí)間不能超過(guò)24h。

2. 從消化道、周?chē)袎乃澜M織等污染因素存在的區域取材，可用含500～1000u/ml的青-鏈霉素BSS液漂洗5～10min，或用10%達克寧注射液沖洗浸泡10min再作培養。

3. 組織塊不易貼壁，可預先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。

4. 原代培養的1～2d內要特別注意觀(guān)察是否有細菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現，要及時(shí)清除。

原代細胞在細胞學(xué)研究、遺傳學(xué)研究、腫瘤研究、藥物篩選、細胞移植、類(lèi)器官培養等眾多研究領(lǐng)域備受歡迎，且原代細胞在生物醫藥領(lǐng)域的應用市場(chǎng)前景廣闊。

三、細胞生物學(xué)檢測

• 2D細胞培養和觀(guān)察
• 3D細胞培養和觀(guān)察
• 原代細胞分離/培養/鑒定
  
• 細胞增殖/毒性檢測（MTT 法/CCK8 法）
• 細胞凋亡檢測（AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法）
• 細胞周期檢測（PI染料標記流式法）
• 細胞遷移/侵襲檢測（劃痕法/Transwell法）
• 流式細胞分選（流式細胞術(shù)）
• 細胞免疫熒光檢測
• 小管形成實(shí)驗（tube formation，體外血管生成實(shí)驗）

• 細胞克隆形成實(shí)驗

• 細胞外泌體分離與鑒定
• 慢病毒包裝及穩轉株篩選
• 電生理檢測
• 個(gè)性化細胞實(shí)驗（藥物篩選等）
  細胞模型已經(jīng)于人類(lèi)疾病研究和治療藥物的篩選領(lǐng)域中得到廣泛應用。我司可根據客戶(hù)的具體方案提供多種細胞模型的構建及相應的細胞生物學(xué)功能檢測。

四、細胞系產(chǎn)品(展示部分）詳詢(xún)業(yè)務(wù)員?。?！

五、公司簡(jiǎn)介  

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè)，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細胞系和多種原代細胞、質(zhì)量穩定的細胞培養試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著(zhù)“守正創(chuàng )新，科學(xué)嚴謹"的理念，我們以高標準塑造行業(yè)品牌，以全新視野構建現代企業(yè)，勇于探索和創(chuàng )新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區，與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系，贏(yíng)得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認可，我們保證將繼續為廣大科研用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)！細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養基 | 血清 | 細胞培養添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實(shí)驗 | RIP 實(shí)驗 | ChIP實(shí)驗 | Co-IP實(shí)驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等。更多信息，歡迎垂詢(xún)上海昆盟生物科技有限公司。