產(chǎn)品展示
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:細胞發(fā)生凋亡時(shí),不同區域內(如細胞膜、細胞漿、線(xiàn)粒體、細胞核等)會(huì )發(fā)生不同的生理生化改變。因此,針對不同區域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。
產(chǎn)品型號:
更新時(shí)間:2021-10-19
廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
訪(fǎng) 問(wèn) 量 :1246
021-51216810
產(chǎn)品分類(lèi)
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RELATED ARTICLES一、細胞凋亡檢測介紹
人體內的細胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關(guān)細胞死亡過(guò)程的研究,已成為生物學(xué)、醫學(xué)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。已知的細胞死亡方式起碼有兩種,即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式,而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。
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細胞凋亡是細胞的一種基本生物學(xué)現象,在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著(zhù)必要的作用。它在生物體的進(jìn)化、內環(huán)境的穩定以及多個(gè)系統的發(fā)育中起著(zhù)重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類(lèi)型,而且具有重要的生物學(xué)意義及復雜的分子生物學(xué)機制。凋亡是多基因嚴格控制的過(guò)程,這些基因在種屬之間非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等。而凋亡過(guò)程的紊亂可能與許多疾病的發(fā)生有直接或間接的關(guān)系。如腫瘤、自身免疫性疾病等,能夠誘發(fā)細胞凋亡的因素很多,如射線(xiàn)、藥物等。
二、檢測方法
細胞發(fā)生凋亡時(shí),不同區域內(如細胞膜、細胞漿、線(xiàn)粒體、細胞核等)會(huì )發(fā)生不同的生理生化改變。因此,針對不同區域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。
1)Annexin V 凋亡檢測
原理:Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴(lài)性磷脂結合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內側,細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白,與PS有高度親和力,它通過(guò)細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。該方法通常結合流式細胞術(shù)一起使用。
2)線(xiàn)粒體膜電位分析(JC-1)
JC-1是一種廣泛用于檢測線(xiàn)粒體膜電位的理想熒光探針??梢詸z測細胞、組織或純化的線(xiàn)粒體膜電位,線(xiàn)粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個(gè)標志性事件。
原理:在線(xiàn)粒體膜電位較高時(shí),JC-1聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產(chǎn)生紅色熒光(Ex/Em = 585/590);在線(xiàn)粒體膜電位較低時(shí),JC-1不能聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)中,此時(shí)JC-1為單體(monomer),可以產(chǎn)生綠色熒光(Ex/Em = 510/527 nm)。這樣就可以非常方便地通過(guò)熒光顏色的轉變來(lái)檢測線(xiàn)粒體膜電位的變化。
3)Caspase活性檢測
Caspase半胱氨酸蛋白酶家族引發(fā)的級聯(lián)反應是細胞凋亡過(guò)程的中心環(huán)節,其激活主要包括線(xiàn)粒體依賴(lài)途徑和死亡受體介導的信號轉導途徑。
原理:激活后的下游 Caspase,通過(guò)切割特異性底物,導致細胞凋亡。Caspase的活化是導致細胞凋亡的中心環(huán)節,細胞凋亡功能的抑制將導致腫瘤的發(fā)生及免疫功能的異常,而細胞凋亡功能亢進(jìn)與組織損傷和器官功能衰竭的發(fā)病密切相關(guān)。
4)TUNEL凋亡檢測
細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和熒光素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細胞的檢測,稱(chēng)為T(mén)UNEL法。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3'-OH形成,很少能夠被染色。由此,TUNEL是檢測DNA 片段化(細胞凋亡)的常用方法。
細胞凋亡是生命的基本現象,是維持體內細胞數量動(dòng)態(tài)平衡的基本措施。在胚胎發(fā)育階段通過(guò)細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發(fā)育;在成年階段通過(guò)細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調控的精確過(guò)程。
三、公司介紹
上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細胞系和多種原代細胞、質(zhì)量穩定的細胞培養試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著(zhù)“守正創(chuàng )新,科學(xué)嚴謹"的理念,我們以高標準塑造行業(yè)品牌,以全新視野構建現代企業(yè),勇于探索和創(chuàng )新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區,與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏(yíng)得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認可,我們保證將繼續為廣大科研用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!
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