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細胞培養基介紹

更新時(shí)間:2022-07-14點(diǎn)擊次數:2368

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細胞培養基的概念 01

細胞培養基是人工模擬細胞在體內生長(cháng)的營(yíng)養環(huán)境,并提供細胞營(yíng)養和促進(jìn)細胞生長(cháng)增殖的基礎物質(zhì)。細胞培養基是細胞培養的基礎,它為動(dòng)物細胞的健康快速成長(cháng)提供營(yíng)養物質(zhì)。所以,只要用到細胞進(jìn)行生物技術(shù)產(chǎn)品的生產(chǎn)制造,就勢必少不了細胞培養基。培養液或培養基,英文都是medium。當它是粉劑時(shí),傾向性地稱(chēng)為培養基,而將粉劑配成液體后,多稱(chēng)為培養液。培養液中常需補加血清、抗生素等成分。



細胞培養基的分類(lèi)02

培養基主要有:天然細胞培養基、合成細胞培養基和無(wú)血清細胞培養基等。


天然細胞培養基是人們早期采用的細胞培養基,直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營(yíng)養價(jià)值高,但成分復雜,差異大、不穩定,來(lái)源也受限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養基,富含氨基酸。血清是天然培養基中有效和常用的培養基,但其組成成分復雜,其中一些成分與功能不明確。血清的來(lái)源有胎牛血清、小?;虺膳Q?、馬血清、雞血清、羊血清及人血清,*泛應用的為胎牛血清和小牛血清。


合成細胞培養基是用化學(xué)成分明確的試劑配制的培養基,組分穩定,主要包括糖類(lèi)、必需氨基酸、維生素、無(wú)機鹽類(lèi)等。1950年,Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細胞培養液,即M199培養基,可用于培養多種種屬來(lái)源的細胞。1951年,Harry Eagle研發(fā)了動(dòng)物細胞體外生長(cháng)的人工合成培養基,即必需培養基(MEM培養基),是目前使用*泛的合成細胞培養基之一。合成細胞培養基發(fā)展至今已有幾十種,除了沿用半個(gè)世紀的基礎合成細胞培養基之外,近年來(lái)還出現了營(yíng)養成分更加豐富的低血清細胞培養基。


在細胞培養中,需要根據細胞種類(lèi)和培養條件的不同選擇合適的合成細胞培養基。目前,在動(dòng)物細胞培養中常用基礎細胞培養基有BME、MEM、DMEM、RPMI-1640、Ham F12、M199 等。由于天然培養基的一些營(yíng)養成分不能被合成細胞培養基*代替,因此一般需在合成細胞培養基中添加5%~10%的胎牛血清。胎牛血清的加入對細胞培養非常有效,但胎牛血清的成分復雜,這對培養產(chǎn)物的分離、純化和檢測會(huì )帶來(lái)一定的不便,為減少胎牛血清的影響,開(kāi)發(fā)了營(yíng)養成分更加豐富的低血清細胞培養基,可以將胎牛血清的使用量降低到1~3%。


無(wú)血清細胞培養基(serum free medium, SFM)是指在使用中無(wú)需添加血清的細胞培養基,且其組成成分不含有任何動(dòng)物組分。按照其組分分類(lèi),還可以分為無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細胞培養基和化學(xué)限定無(wú)血清細胞培養基,前者組分中可能含有某些植物來(lái)源成分,而后者*由化學(xué)成分明確的組分組成。


其中,無(wú)動(dòng)物組分無(wú)血清細胞培養基是目前在生物制藥行業(yè)中應用*泛的,它提高了細胞培養的質(zhì)量,避免了使用血清帶來(lái)的麻煩。目前,已有多種無(wú)血清培養基上市,如雜交瘤細胞無(wú)血清培養基、CHO細胞無(wú)血清培養基、Vero細胞無(wú)血清培養基和NS0 細胞無(wú)血清培養基等。無(wú)血清培養基通常添加生長(cháng)附加成分,如激素與生長(cháng)因子、低分子營(yíng)養成分和轉鐵蛋白等促細胞生長(cháng)的附加成分,一般包括胰島素、孕酮、腐胺、轉鐵蛋白等。



細胞培養基的基本成分03

細胞培養基的主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無(wú)機鹽和其它一些輔助物質(zhì)。人工合成培養基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細胞生長(cháng)和繁殖。


氨基酸:組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴(lài)氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過(guò)轉氨作用由其他物質(zhì)轉化而來(lái)。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,因為谷氨酰胺是作為能源及碳源物質(zhì)同時(shí)被細胞利用,是細胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時(shí),細胞生長(cháng)不良而死亡,所以各種培養液中都含有較多的谷氨酰胺。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構體,D型氨基酸不能被利用。


維生素:維持細胞生長(cháng)的一種生物活性物質(zhì),對細胞代謝有重大作用。它們在細胞中大多形成酶的輔基或輔酶,沒(méi)有它們,酶便沒(méi)有活性,代謝活動(dòng)將無(wú)法進(jìn)行。維生素分為水溶和脂溶兩大類(lèi),培養液中直接采用ATP和輔酶。


葡萄糖:大部分培養基都以葡萄糖作為能量來(lái)源之一。


無(wú)機鹽:維持培養基滲透壓平衡,參與細胞的代謝活動(dòng)。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+ 等。Na+是細胞外液中最主要的陽(yáng)離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于激活某些酶是必需的,并在調節細胞內環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將組織內部細胞之間相互粘著(zhù),在細胞內參與許多重要的細胞生理活動(dòng),如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時(shí),為了減少細胞的聚集和附著(zhù),要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質(zhì)的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質(zhì)代謝和生理功能調控有重要作用。


其他成分:表皮生長(cháng)因子、胰島素、多肽、核苷、嘌呤等??蓭椭毎目寺』囵B及維持某些特殊細胞系的生長(cháng)。


上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細胞系、質(zhì)量穩定的細胞培養試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)、專(zhuān)業(yè)周到的技術(shù)支持。本著(zhù)“守正創(chuàng )新,科學(xué)嚴謹"的理念,我們以高標準塑造行業(yè)品牌,以全新視野構建現代企業(yè),勇于探索和創(chuàng )新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區,與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏(yíng)得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認可,我們保證將繼續為廣大科研用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養基 | 血清 | 細胞培養添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等;ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測序分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實(shí)驗 | RIP 實(shí)驗 | ChIP實(shí)驗 | Co-IP實(shí)驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測 等。


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