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如何選擇合適的內參抗體?

更新時(shí)間:2021-09-16點(diǎn)擊次數:2415

如何選擇合適的內參抗體?


Tips:在選擇內參抗體時(shí),我們需要遵循幾個(gè)原則:

1.種屬來(lái)源
哺乳動(dòng)物的樣本需要選擇哺乳動(dòng)物中穩定表達的蛋白作為內參,同樣的,植物樣本需要選擇植物中穩定表達的蛋白作為內參。


2. 細胞定位
靶標蛋白的細胞定位不同,適合的內參也不同。如全細胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等,膜蛋白一般選擇Na K ATPase,核蛋白則選擇Lamin B1、Histone H3等。

內參.png

3. 分子量
內參蛋白的分子量需要與目標蛋白的分子量有所區別,否則兩者條帶無(wú)法分開(kāi)。一般目的蛋白與內參蛋白大小至少相差5K Da以上。


4. 表達因素
內參選擇還需要考慮實(shí)際的實(shí)驗環(huán)境。GAPDH是代謝類(lèi)蛋白,在活組織中表達較穩定。beta-actin和beta-tubulin是結構蛋白,不同組織的細胞結構會(huì )有差異性。


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